服務熱線
021-59989018
產品簡介:
產品型號:
廠商性質:經銷商
訪問量:278
更新時間:2025-04-09
人肺大動脈平滑肌細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
肺動脈組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7005 |
細胞簡介:
人肺大動脈平滑肌分離自肺大動脈組織;肺大動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,在主動脈之前向左上后方斜行,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,經肺門入肺。肺動脈干位于心包內,為一粗短的動脈干。起自右心室,在升主動脈前方向左后上方斜行,至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗,經升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進入右肺上、中、下葉。肺大動脈平滑肌細胞是肺血管的重要結構細胞之一,在調控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用。肺大動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。肺大動脈平滑肌細胞的異常是肺動脈高壓發生發展的重要病理學特征,其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關鍵。研究表明,急性和慢性缺氧均可導致肺動脈高壓,即缺氧性肺動脈高壓,推斷缺氧可能是通過促進肺大動脈平滑肌細胞的增殖而參與缺氧性肺動脈高壓的發生發展。肺大動脈平滑肌細胞主要功能:①細胞表面表達介質(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應;②是多數重要動脈疾病的靶細胞。肺大動脈平滑肌細胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的人肺大動脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人肺大動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態最佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品:
小鼠結合蛋白4(RBP-4)試劑盒 96T/48T
小鼠結合蛋白(RBP)試劑盒 96T/48T
小鼠生長因子(GH)試劑盒 96T/48T
小鼠(SS)試劑盒 96T/48T
小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)試劑盒 96T/48T
Rat myosin (Myosin) ELISA Kit 大鼠肌球蛋白(Myosin)試劑盒
Humanneuraminidase,NAELISAKit 人神經酶(NA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Duckai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2試劑盒鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞樣品蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousedopamine,DAELISAKit小鼠多巴胺(DA)試劑盒規格:96T/48T
鹵酸脫鹵酶樣水解酶域內含蛋白1A抗體
早期發育調控蛋白1/EDR1抗體
IL20RB重組大鼠 IL20RB 蛋白 Protein
GPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7 0.5mgGPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7) 0脂?;嫉鞍拙厶?span>-3(多肽)
CD28重組人 CD28 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein
CLEC10A Protein Human 重組人 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 (Fc 標簽)
EPHB1 Protein Mouse 重組小鼠 EphB1 / EPHT2 蛋白 (His & GST 標簽)
GPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7 0.5mgGPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7) 0脂酰基醇蛋白聚糖-3(多肽)
CLEC10A Protein Human 重組人 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 (Fc 標簽)
IL20RB重組大鼠 IL20RB 蛋白 Protein
EPHB1 Protein Mouse 重組小鼠 EphB1 / EPHT2 蛋白 (His & GST 標簽)
CD28重組人 CD28 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein
人肺大動脈平滑肌細胞大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)試劑盒 ,英文名: IGFBP3 ELISA Kit
Mouse visceral adipose specific serine protease inhibitor (vaspin) ELISA Kit 小鼠內臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒
MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKIT 小鼠血管內皮細胞生長因子(VEGF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanCyclicAMPresponseelemebindingprotein,CREBELISAKit人cAMP反應元件結合蛋白
細胞AX1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitALP-B大鼠骨特異性堿性0酸酶B